■ Maʻalahi e hoʻohana: hiki ke maʻalahi ka hana o ka polokalamu ma waena o 1 h. Hiki ke hoʻololi a hoʻouna ʻia ka papahana hoʻomākaukau PCR / qPCR i kūkulu ʻia i loko.
■ Mea hoʻohana kūpono: Hoʻololi i ka piko pipette me Beckman Biomek 3000 ʻōnaehana.
■ Mālama maʻalahi: hiki ke hoʻololi maʻalahi ʻia ka module pipetting automated (APM) a hoʻihoʻi ʻia no ka debugging.
■ High pololei a me ka pololei.
Hiki ke hoʻonohonoho pono ʻia nā huahana āpau no ODM / OEM. No nā kikoʻī,e kaomi i ka lawelawe i hoʻopilikino ʻia (ODM / OEM)
Hōʻike 1: hōʻike nā hopena hālau qPCR i ka hana hou maikaʻi c dilewela nā laʻana cDNA o 7 μl NIH 3T3 mau huna i 4 mau manawa me 21 μl o ka wai ma ka lakio o 1: 4. Roche LightCycler 480 manawa maoli fluorescence helu PCR mea hana a me SuperReal PreMix Plus (SYBR Green) i hoʻohana ʻia no ka ʻike. |
|
Kiʻi 2: ʻO ke kiʻekiʻena kiʻekiʻe ke hoʻohālikelike ʻia i ka pipetting manual (Hema: Manuahi; Kākau: TEasy Automated Pipetting) 4 mau hana hou o ka hoʻonui GAPDH kanaka (hālau kiʻekiʻe). Hoʻohui 2 μl cDNA i 18 μl MasterMix e hana i 20 μl ʻōnaehana hopena. ʻO Roche LightCycler 480 mea hoʻohana manawa maoli fluorescence mea hoʻohana PCR nui a me SuperReal PreMix Plus (SYBR Green) i hoʻohana ʻia no ka ʻike. |
Mai kona hoʻokumu ʻia ʻana, ke hoʻomohala nei kā mākou hale hana i nā huahana papa honua mua me ka hoʻopaʻa ʻana i ke ʻano
o ka maikaʻi ma mua. Ua loaʻa i kā mākou huahana ka maikaʻi maikaʻi loa i ka ʻoihana a me ka waiwaiabletrusty i waena o nā mea kūʻai aku a kahiko.