■ Hoʻololi kiʻekiʻe: Ka laulā hihiu o ka hoʻomaka ʻana o ka laʻana o ka laʻana, kūpono no ka huki ʻana i kahi laʻana o ka nui i hoʻokahi pane.
■ Nā hua kiʻekiʻe: Hoʻonui ka hana i ka Precipitation i ka hua o RNA i kahi laʻana.
■ Hoʻohana ākea: kūpono no nā laʻana like ʻole e like me nā mea kanu a me nā holoholona, nā hunaola i hoʻoulu ʻia, ke koko, ka wai o ke kino, etc.
■ Hana wikiwiki: Genomic DNA hiki ke loaʻa i loko o 1 hola ..
ʻAno: Hoʻokumu ʻia ka Precipitation
Laʻana: ʻO Virus, bacteria, fungus, holoholona, mea kanu mea kanu, nā pūnaewele i hoʻomeheu ʻia a me ka wai o ke kino.
Pahuhopu: RNA
Ka manawa hana: ~ 1 hola
Nā noi: Hoʻemi ka TRNzol Universal reagent i ka hoʻohaumia o nā impurities e like me DNA a me nā protein i ka huina RNA i hoʻomaʻemaʻe ʻia, a hiki ke hoʻohana pono ʻia no nā hoʻokolohua biology molekiola e like me Northern Blot, Dot Blot, PolyA screening, in vitro translation, RNase protection analysis, cDNA library building , RT-PCR, PCR manawa maoli a me ke kaʻina kiʻekiʻe-throughput.
Hiki ke hoʻonohonoho pono ʻia nā huahana āpau no ODM / OEM. No nā kikoʻī,e kaomi i ka lawelawe i hoʻopilikino ʻia (ODM / OEM)
Nā Hanana: 30 mg ʻiʻo ʻiole ʻiole, 100 mau lau laiki i hōʻiliʻili ʻia e ka wili nitrogen wai; 1 × 106Ua ʻohiʻohi ʻia nā hunaola hanauna HepG2 a me 700 μl Saccharomyces Cerevisiae moʻomeheu (OD600 = 0.9) e ka centrifugation. 1 ml o TRNzol Universal Reagent mai TIANGEN a me nā huahana kūpono mai ka mea hoʻolako L a me T i hoʻohui ʻia i kēlā me kēia aliquot o ka laʻana a ua hana ʻia ka RNA unuhi ma hope o nā kuʻina i hāʻawi ʻia e kēlā me kēia mea hāʻawi. ʻO ka vol elution 80 μl, 50 μl, 30 μl a me 30 μl no nā hāpana ʻehā. Ua hoʻouka ʻia ka 3 μl o ka eluate i kēlā me kēia laina.
MIII: TIANGEN Marker III;
Lawe ʻia ka electrophoresis ma 6 V / cm no 30 min ma ka agarose 1%.
Nā hualoaʻa: TIANGEN TRNzol Universal Reagent hiki ke huki i ka maʻemaʻe kiʻekiʻe a me ka maikaʻi RNA maikaʻi mai ka ʻiole ʻiole, nā lau laiki, nā pūnaewele i hoʻomeheu ʻia a me nā mea hu. Hoʻohālikelike ʻia ka maikaʻi RNA a i ʻole kiʻekiʻe iki aʻe ma mua o nā huahana L a me T.
ʻAʻole lawa ka lysis cell A-1 a i ʻole ka homogenization
---- Hoʻoemi i ka hoʻohana ʻana i ka laʻana, hoʻonui i ka nui o ka buffer lysis, hoʻonui i ka homogenization a me ka manawa lysis.
ʻO ka nui o ka laʻana A-2
---- E hoʻemi i ka nui o ka laʻana i hoʻohana ʻia a hoʻonui paha i ka nui o ka buffer lysis.
A-1 lawa ʻole ka lysis pūnaewele a i ʻole ka homogenization
---- Hoʻoemi i ka hoʻohana ʻana i ka laʻana, hoʻonui i ka nui o ka buffer lysis, hoʻonui i ka homogenization a me ka manawa lysis.
ʻO ka nui o ka laʻana A-2
---- E nānā i ka nui o ka hiki ke hana.
ʻAʻole elute loa ʻo A-3 RNA mai ke kolamu
---- Ma hope o ka hoʻohui ʻana i ka wai RNase-Free, waiho iā ia no kekahi mau minuke ma mua o ka centrifuging.
A-4 Ethanol i ka eluent
---- Ma hope o ka holoi ʻana, centrifuge hou a hemo i ka pale holoi holoi i ka hiki.
ʻAʻole hoʻopau loa ʻia ka moʻomeheu A-5 cell
---- Ke ʻohiʻohi ʻana i nā pūnaewele, e ʻoluʻolu e wehe i ka moʻomeheu moʻomeheu i hiki.
A-6 ʻAʻole mālama nui ʻia nā pūnaewele i RNAstore
---- ʻoi aku ka nui o ka nui RNAstore ma mua o ka waena waena moʻomeheu moʻomeheu; no laila e hoʻonui ʻia ka ikaika centrifugal. Kuhi ʻia e centrifuge ma 3000x g.
A-7 Low RNA ʻike a me ka nui i ka hāpana
---- E hoʻohana i kahi laʻana maikaʻi e hoʻoholo inā hopena ka hopena haʻahaʻa e ka hāpana.
A-1 ʻAʻole hou nā mea
---- Pono e mālama pono ʻia nā mea hou i loko o ka nitrogen wai a i ʻole hoʻokomo koke ʻia i loko o ka mea reagent RNAstore e hōʻoia i ka hopena pōʻalo.
ʻO ka nui o ka laʻana A-2
---- Hoʻoemi i ka nui o ka laʻana.
A-3 RNase hoʻowahāwahān
---- ʻOiai ʻaʻole i loaʻa ka buffer i ka pahu i ka RNase, maʻalahi e hoʻohaumia iā RNase i ka wā o ka hana unuhi ʻana a lawelawe ʻia me ka mālama.
Hoʻohaumia A-4 Electrophoresis
---- E kuapo i ka pale ʻaila electrophoresis a hōʻoia i ka manuahi a me ka hoʻouka Buffer me ka hoʻowahāwahā ʻole o RNase.
A-5 Nui loa ka hoʻouka ʻana no electrophoresis
---- E ho'ēmi i ka nui o ka hoʻouka ʻana o nā laʻana, ʻaʻole pono ka hoʻouka ʻana o kēlā me kēia luawai ma mua o 2 μg.
A-1 Laʻana nui loa
---- Hoʻoemi i ka nui o ka laʻana.
A-2 Loaʻa i kekahi mau laʻana kahi ʻike DNA kiʻekiʻe a hiki ke mālama ʻia me DNase.
---- Hana i ka mālama RNase-Free DNase i ka hopena RNA i loaʻa, a hiki ke hoʻohana pololei ʻia ka RNA no nā hoʻokolohua hope aʻe ma hope o ka lapaʻau ʻana, a i ʻole hiki ke hoʻomaʻemaʻe hou ʻia e nā pahu hoʻomaʻemaʻe RNA.
No nā aniani, hoʻomoʻa ʻia ma 150 ° C no 4 h. No nā ipu ea, hoʻohuʻu i loko o 0.5 M NaOH no 10 mau min, a laila holoi pono ʻia me ka wai ʻole RNase a laila sterilize e hoʻopau loa iā RNase. Nā reagents a i ʻole nā hāʻina i hoʻohana ʻia i ka hoʻokolohua, ʻo ka wai hoʻi, pono me ka manuahi o RNase. E hoʻohana i ka wai ʻole RNase no nā hoʻomākaukau hoʻomākaukau (hoʻohui i ka wai i kahi ʻōmole aniani maʻemaʻe, e hoʻohui iā DEPC i ka hopena hope loa o 0.1% (V / V), hoʻoluliluli i ka pō a me ka autoclave).
Mai kona hoʻokumu ʻia ʻana, ke hoʻomohala nei kā mākou hale hana i nā huahana papa honua mua me ka hoʻopaʻa ʻana i ke ʻano
o ka maikaʻi ma mua. Ua loaʻa i kā mākou huahana ka maikaʻi maikaʻi loa i ka ʻoihana a me ka waiwaiabletrusty i waena o nā mea kūʻai aku a kahiko.