Pahu ʻImi ʻo HRM (EvaGreen)

Hiʻona

■ Kiʻekiʻena hoʻonā: Hoʻohui i nā dyes saturated EvaGreen, i loaʻa ka hoʻonā kiʻekiʻe o ka piʻo hoʻoheheʻe i ka moku i kūpona a hiki ke hoʻokaʻawale i ka loli o hoʻokahi kumu.
■ Ke kūlana kiʻekiʻe: E hoʻohana i ka antibody i hoʻololi ʻia i ka hotstart DNA polymerase e hōʻemi i ka hoʻonui ʻole kikoʻī a hoʻomaikaʻi i ka kikoʻī.
■ ʻO ke kūpaʻa kiʻekiʻe: Hoʻonui ka ʻōnaehana Buffer akahele i ka paʻa o ka piʻo hoʻoheheʻe a hoʻomaikaʻi i ka hilinaʻi o nā hopena.
■ ROX hoʻoponopono: hoʻopili ʻokoʻa ʻo ROX kala, kahi maʻalahi e hoʻohana a loaʻa nā hualoaʻa kūpono aʻe.

Hoakaka

ʻAno: Hoʻoponopono Antibody Taq DNA polymerase, EvaGreen.
Nā noi: Kākau SNP i ʻike ʻia; Loiloi SNP ʻike ʻole ʻia; Ke ʻimi nei i nā genes mutant ʻike ʻole ʻia; Nānā PCyl methylation.

Hiki ke hoʻonohonoho pono ʻia nā huahana āpau no ODM / OEM. No nā kikoʻī,e kaomi i ka lawelawe i hoʻopilikino ʻia (ODM / OEM)

×

Ua lawe ʻia ʻo Genomic DNA mai 100 μl o ka hāpana koko kanaka e hoʻohana ana iā TIANamp Blood DNA Kit. 50 ng DNA i hoʻouka ʻia no ka ʻike PCR manawa maoli. Wahi a ka waihona NCBI SNP, ua koho ʻia ka SNP ʻike ʻia o ka gen FEN1 (RS 174538) a ʻike ʻia me ka hoʻohana ʻana iā Roche LightCycle480. Penei nā hopena:

Hōʻike nā hualoaʻa he HRM Analysis Kit kahi ala maikaʻi SNP locus analysis me ke kiʻekiʻe o ka hoʻoheheʻe ʻana o ka genotype like, ka hoʻonā maopopo o nā genotypes ʻokoʻa a ʻaʻohe kuhi hewa.

ʻIke SNP: …… CGGAAGAACACGTCG [A / G] CAGGAGCAGGCGCCT …… (Allele Frequency: A = 0.314, G = 0.686)

Mea hoʻomaka: No ka ʻāpana 108 bp (FEN1_F: CCTCAACGCTCTCACCATTTTG; FEN1_R: GGCACTTCCTTTTCCGGTTGTG)